Sammendrag
1 SAMMENDRAG
Rotbark og stammebark av Erythrina senegalensis ble ekstrahert hver for seg, først med diklormetan og så med metanol, og gav 4 ekstrakter: diklormetanekstrakt fra rotbark (DR), metanolekstrakt fra rotbark (MR), diklormetanekstrakt fra stammebark (DS) og metanolekstrakt fra stammebark (MS).
Det ble arbeidet videre med diklormetanekstraktet fra rotbark. DR ble fraksjonert på silikakolonne, og gav 28 fraksjoner, merket I-XXVIII
Alle fraksjonene I-XXVIII ble testet for antifungal aktivitet med en TLC bioautografisk agaroverleggingsmetode. Alle fraksjonene fra X og oppover, unntatt fraksjon XVIMeOH viste aktivitet mot C.albicans.
Fraksjon XIV og XV ble slått sammen og fraksjonert på nytt på silikakolonne. Det gav opphav til 13 nye fraksjoner, 2I-2XIII.
Fraksjon XVIII og XIX ble også slått sammen og fraksjonert på nytt på silikakolonne. Det gav opphav til 9 nye fraksjoner, 3I-3IX
Fraksjonene fra 2-serien og 3-serien ble testet for antifungalaktivitet med samme metode mot C.albicans. Fraksjon 2VI-2VII, 2XII og 2XIII, samt fraksjon 3VI-3IX viste seg å være aktive.
Fraksjon 2VI ble separert videre på VersaFlash C-18 kolonne, og gav fraksjon 4I-4VIII. NMR-spektre av fraksjonene viste at fraksjon 4I -4III var ganske like, og på bakgrunn av spektrene fra disse 3 fraksjonene ble erybraedin A identifisert ved å sammenligne våre spektraldata med litteraturdata.
Erybraedin A er ikke tidligere påvist i E.senegalensis.
Fraksjonene 4I-4III ble slått sammen, renset en gang til på VersaFlash C-18 kolonne, og gav fraksjonene 6I-6VI. NMR-spektrum av fraksjon 6III viste en ganske ren erybraedin A fraksjon, så denne ble brukt til å bestemme optisk-, og biologisk aktivitet.
Erybraedin A hadde en optisk aktivitet på [α]D = -62 ° (ved 20 °C, c= 0,0335 g/ml i diklormetan)
Erybraedin A ble testet for DPPH-scavenging, 15-LO hemming og antifungal aktivitet mot C.albicans. Substansen viste seg å være en dårlig DPPH-scavenger men en meget sterk hemmer av 15-LO. (IC50 -verdi 23 ± 2 μM). Den gav også hemming av vekst av C.albicans.
Fraksjon XX ble separert på VersaFlash C-18 kolonne, til 9 fraksjoner 5.0- 5VIII. Fraksjon 5I-5III ble slått sammen på bakgrunn av NMR-spektrum, og separert på nytt på kromatotron til fraksjon 7I-7V. Ved å sammenligne våre spektraldata med litteraturdata ble en blanding av shinpterocarpin og phaseollin i forhold 3:1 identifisert i fraksjon 5I-5III, og i den opprensede fraksjonen 7III. Fraksjon 7III ble bruk til å bestemme optisk- og biologisk aktivitet av shinpterocarpin-phaseollin (3:1).
Shinpterocarpin-phaseollin (3:1) hadde en optisk aktivitet på [α]D = -117 ° (ved 20 °C, c= 0,054 g/ml i diklormetan)
Shinpterocarpin– phaseollin (3:1) ble også testet for DPPH-scavenging, 15-LO hemming og antifungal aktivitet mot C.albicans. Blandingen viste seg å være en dårlig DPPH-scavenger men en meget sterk hemmer av 15-LO (IC50-verdi 16,5 ±1,1). Den gav også hemming av vekst av C.albicans.
Deler av hovedoppgaven er utført i Mali, i perioden 14.januar til 21. april. I løpet av denne tiden ble det gjennomført 2 feltarbeid, et i Kolokani og et i Dioila. Til sammen ble 45 healere intervjuet, og 38 av disse brukte Erythrina senegalensis i sin praksis. De hyppigste indikasjonene var amenorré, malaria, gulsott og ødem.