Regulering av signalmekanismer i celler fra pankreaskreft: Samspill mellom stellatceller og kreftceller

Abstract

Bukspyttskjertelkreft er blant kreftformene med dårligst 5-års overlevelse. For å kunne forbedre diagnostikk og behandling er det svært viktig å få bedre forståelse for molekylære mekanismer som regulerer cellemigrasjon og metastasering. Samspillet mellom stroma og kreftceller spiller en viktig rolle i utvikling av bukspyttkjertelkreft. IL-1α er en av faktorene kreftcellene produserer og som resulterer i endring av inflammasjons- og immunrespons via mekanismer som involverer stellatceller. Det er vist at TGFβ kan nedregulere IL-1R1 i stellatcellene og det er mulig at Smad7 kan være med på å regulere dette. Målet med denne oppgaven var å undersøke om og hvordan IL-1α og TGFβ påvirker stellatcellenes evne til å støtte kreftcellenes migrasjon og om TGFβs virkingsmekanisme kunne utnyttes for å hemme IL-1α-mediert samspill mellom kreft- og stellatceller. Skrape-analyse ble benyttet som hovedmetode i denne oppgaven for å undersøke migrasjon av en kreftcellelinje fra pankreaskreft (BxPC3-celler). IL-1α og TGFβ, alene eller i kombinasjon, stimulerte ikke BxPC3-cellene til migrasjon. Antistoff mot IL-1 (IL-1RA) hadde heller ikke effekt, noe som tyder på at IL-1α ikke hadde autokrin effekt. Kondisjonert medium fra stellatceller fra ulike pankreassvulster stimulerte kreftcellenes migrasjon i forskjellig grad. Etter behandling av ulike stellatceller med IL-1α og TGFβ alene eller i kombinasjon fikk vi ulike resultater. Noen stellatceller stimulerte kreftcellenes migrasjon etter behandling med IL-1α betydelig mer enn andre. TGFβ-behandling av stellatceller ga signifikant reduksjon av IL-1α-indusert migrasjonseffekt og av ustimulert migrasjonseffekt for enkelte stellatceller. En av stellatcellelinjene med høyt uttrykk av Smad7 og IL-1R1 stimulerte BxPC3-migrasjon mer etter IL-1α-behandling med hemmende effekt av TGFβ. Når Smad7 ble nedregulert i disse cellene, ble også IL-1R1 nedregulert. Smad7-nedregulerte stellatceller ga betydelig svakere migrasjon av BxPC3-celler etter stimulering med IL-1α sammenlignet med kontroll. Lignende resultater ble observert med 12 timers indirekte kokultur med BxPC3 cellene i stede for IL-1α-behandling. Disse resultatene viser at stellatcellene kan variere mye i hvor stor evne de har til å stimulere kreftcellenes migrasjon. Stellatcellene varierer også i hvordan de svarer på forskjellige stimuli. Stellatceller kan derfor ikke betraktes som en uniform celletype. Resultatene viser også at ved å nedregulere Smad7 i celler med høyt uttrykk, hemmes IL-1α-mediert kommunikasjon mellom stellat- og kreftcellene, som resulterer i mindre migrasjon. Det tyder på at Smad-7 nivåer i stellatcellene kan være med på å bestemme i hvilken grad kreftcellene migrerer. Videre forskning om Smad7s rolle i denne kommunikasjonen er ønskelig.