Abstract
Fagara zanthoxyloides er en viktig medisinplante innenfor tradisjonell medisin i Vest-Afrika og Kamerun. Den brukes til daglig som tyggestilk av mange, særlig i Nigeria. Planten har en lang rekke andre bruksområder blant annet som anti-helmintikum, malaria inkludert. Malaria er en utbredt sykdom som rammer et stort antall mennesker i Mali og på verdensbasis hvert år. Ved stimulering av immunsystemet kan malaria-rammede føle seg bedre. Polysakkarider har i mange studier vist en immunologisk aktivitet. Målet med oppgaven var derfor å isolere polysakkarider og undersøke de med henblikk på struktur og biologisk aktivitet. I tillegg var det et mål å finne ut om bladene er så aktive at de kan brukes istedenfor bark og rotbark, da planten skades ved innhøsting av de sistnevnte. Det ble isolert polysakkarider fra blader, bark og rotbark. Dette ble gjort ved at tørket og fint pulverisert materiale fra de tre plantedelene ble ekstrahert med ulike organiske løsemidler for å fjerne lavmolekylære og upolare forbindelser. Polysakkaridene ble så isolert ved ekstraksjon både i etanol og vann i forholdet 1:1 ved 70 ºC og i 100 ºC vann. Råekstraktene fra 100 ºC vann ble behandlet med α-amylase for å fjerne stivelse. De seks råekstraktene ble renset ved dialyse og polysakkaridene ble separert etter ionestyrke ved ionebytterkromatografi med ANX Sepharose Fast Flow (high sub). Det ble først eluert med vann og deretter med NaCl i økende ionestyrke slik at man fikk nøytrale og ulike sure fraksjoner. Fraksjonene ble analysert på GC og testet med komplementfikseringstest. De fraksjonene som var mest interessante med hensyn til struktur og aktivitet ble gelfiltrert. Gelfiltreringen er en videre måte å rense prøven på og i tillegg en måte å separere polysakkarider etter molekylær størrelse. Hos 7 fraksjoner ble det sett nærmere på bindingsforholdene mellom sukkermolekylene ved hjelp av GC-MS. Det var de med mest interessant monosakkaridsammensetning og høyest komplementfikserende aktivitet som ble undersøkt. Det ble valgt ut en fraksjon fra hver av de seks «råekstraktene». I tillegg ble det undersøkt en svært biologisk aktiv nøytral fraksjon som kom fra rotbark - ekstraktet 50% et. i vann. Alle de sju fraksjonene så ut til å inneholde arabinogalaktaner type II, som i flere studier har vist å være viktig for biologisk aktivitet. Tilstedeværelse av AGII ble bekreftet for alle fraksjonene, med unntak av RB50%Ne2, ved hjelp av Yariv reagens-test. I tillegg hadde alle fraksjonene andre typiske strukturelementer som man forbinder med pektiner. Nesten alle de gelfiltrerte fraksjonene fra bark og rotbark viste høyere komplementfikserende aktivitet enn den positive kontrollen BP II. RBWNe2, BA50%1.2 og BA50%Ne1 visten ingen komplementfikserende aktivitet. Fraksjonene fra bladene var også biologisk aktive, men ikke like aktive som den positive kontrollen. Det kan se ut som om det kan være en sammenheng mellom molekylær størrelse og biologisk aktivitet. RB50%Ne1 og RB50%2.1 var de mest aktive fraksjonene fra rotbark og også de med størst molekylær størrelse av fraksjonene fra rotbark. Også hos bark og blader var det den fraksjonen med størst molekyær størrelse som var mest aktiv i forhold til de andre fraksjonene fra bark og blader.