| dc.description.abstract | Hyperlipidemi er en økende risikofaktor for utvikling av hjerte- og karsykdommer, og statiner (HMG-CoA-reduktasehemmere) er i stor grad brukt som medikamentell behandling mot dette. Statiner er generelt godt tolerert, men i noen tilfeller kan legemiddelgruppen føre til myotoksisitet, fra mild myopati til alvorlig rabdomyolyse. Mekanismen bak statinindusert myotoksisitet er ikke klarlagt, og flere hypoteser har blitt testet. Hovedfokuset i denne oppgaven har vært legumain, en cysteinprotease som har stor strukturlikhet med caspasene involvert i apoptose. Det var av interesse å studere hvilken effekt simvastatin hadde på legumain, samt andre cysteinproteaser (cathepsin B og L), i primære humane myotuber.
Primære humane skjelettmuskelceller isolert fra M. obliquus abdominis fra friske frivillige donorer ble benyttet som cellemodell. Effekten av simvastatin ble studert etter behandling i 48 timer på dag 5 av differensieringen av myotubene. For å se om simvastatineffekten skyldtes en hemming av HMG-CoA-reduktasen, ble myotubene behandlet med simvastatin og mevalonolakton (ML), geranylgeranylpyrofosfat (GGPP) eller farnesylpyrofosfat (FPP). Legumain, cathepsin B og L ble analysert i cellelysater ved immunblotting, real-time-PCR, ELISA og enzymaktivitetsmåling. Lokaliseringen av legumain, cathepsin B og L ble undersøkt ved subcellulær fraksjonering og konfokalmikroskopi.
Resultatene viste at simvastatin reduserte aktiviteten av både legumain og cathepsin B i myotubene. Ekspresjonen av aktiv legumain og -cathepsin B ble redusert i myotubene etter simvastatinbehandling, mens aktiv cathepsin L holdt seg stabil. Proformene til både legumain, cathepsin B og L økte etter samme behandling. Real-time-PCR viste ingen endring i hverken legumain- eller cathepsin B mRNA etter simvastatinbehandling, men en tendens til økt cathepsin L mRNA ble vist. Videre ble både legumain, cathepsin B og L uttrykt kun i membranfraksjonen etter subcellulær fraksjonering, og ingen lekkasje av cysteinproteasene ble observert etter simvastatinbehandling. Dette ble i tillegg bekreftet med konfokalmikroskopi, der legumain kun viste vesikulær lokalisasjon. Simvastatineffekten ble delvis motvirket i myotuber behandlet med simvastatin sammen med ML eller GGPP, noe som tyder på at simvastatin hemmer gentranskripsjonen gjennom hemming av HMG-CoA-reduktasen. | nor |