Intracellulær interaksjon mellom ganciclovir og lamivudin

Abstract

Sammendrag

Denne hovedfagsoppgaven tar sikte på å undersøke intracellulær interaksjon mellom to antivirale midler, ganciklovir og lamivudin. De antivirale midlene ganciklovir og lamivudin brukes primært mot henholdvis infeksjoner med cytomegalovirus (CMV) og HIV (humant immunsvikt virus) /hepatitt B virus. Det er vanlig å bruke de to legemidlene samtidig når en med CMV infeksjon er co-infisert med enten HIV/ hepatitt B virus infeksjon. Det er tidligere vist at ganciklovir ikke påvirker trifosforyleringen og dermed aktiveringen av lamivudin i hepatitt B infiserte celler. Hittil er liknende forsøk ikke gjort for å undersøke effekten av lamivudin på trifosforyleringen og aktiveringen av ganciklovir. Denne oppgaven tar derfor sikte på å måle effekten av lamivudin på ganciklovir trifosfat nivåene i CMV infiserte humane embryonale fibroblast celler i celler i kultur.

Ganciklovir trifosfat ble relativ-kvantifisert ved hjelp av væske kromatografi (HPLC-UV). Inkorporering av H3-GCV-TP i CMV-DNA ble målt ved hjelp av en væske scintillasjonsteller.

Inkorporering av H3-GCV-TP i virus DNA viste at inkorporeringen var redusert med over 50 % i celler inkubert med både lamivudin og H3-GCV sammenlignet med celler inkubert kun med H3-GCV. Derimot viste GCV-TP konsentrasjonen i CMV infiserte celler økningen i konsentrasjonen ved koinkuberingen.

Ut i fra resultatene kan man ikke trekke en konklusjon på at trifosforyleringen av ganciklovir påvirkes av lamivudin, men resultatene fra inkorporering av H3-GCV-TP indikerer at det er en interaksjon mellom GCV og lamivudin. Konsentrasjonsmåling av inkorporeringen av H3-GCV-TP i virus DNA i forhold konsentrasjonsmåling av GCV-TP i celler ligger nærmere det kliniske bilde man skal undersøke. Begge metodene har sine svakheter og derfor er det nødvendig å bekrefte dette ved hjelp av flere forsøk og eventuelt ved alternative metoder.

En sikker konklusjon på om trifosforyleringen av ganciklovir påvirkes av lamivudin krever ytterligere utvidede undersøkelser.