Elektromembranekstraksjon av narkotiske stoffer fra fullblod og likblod

Abstract

I denne oppgaven har det blitt arbeidet med å utvikle et stillestående EME-system for ekstraksjon av de narkotiske stoffene 2,5-dimetoksi-4-iodamfetamin (DOI), katinon, ketamin, 3,4-metylendioksi-amfetamin (MDA), 3,4-metylendioksi-metamfetamin (MDMA) og metamfetamin fra ubehandlet fullblod. Det har vært fokusert på å optimalisere systemet for små prøvevolumer, på et lavt spenningsnivå og med kort ekstraksjonstid. I det endelige oppsettet ble det ekstrahert fra 80 μl fullblod (donorfase) over i 10 μl 10 mM CH3COOH (akseptorfase). Den kunstige væskemembranen ble laget ved å dyppe en 5 cm lang hulfiber i det organiske løsemiddelet ENB i 5 sekunder. Akseptorfasen ble sprøytet inn i hulfiberlumen og katoden ble ført inn. Deretter ble hulfiberen med akseptorfase og katode plassert sammen med anoden i donorfasen. Et spenningspotensial på 15 V ble satt på og det ble ekstrahert 5 minutter. Etter endt ekstraksjon ble hulfiberen tatt ut av donorfasen. Akseptorfasen ble trukket ut av hulfiberlumen og analysert med CE eller LC-MS. Systemet ble validert etter optimalisering av de ulike betingelsene og parameterne. Deteksjonsgrensene for alle stoffene var godt under nedre del av anslått relevant konsentrasjonsområde på 40 ng/ml. Det relative standardavviket på konsentrasjonsnivåene 10 ng/ml, 50 ng/ml og 500 ng/ml lå henholdsvis mellom 8-27 %, 12-26 % og 7-32 %. Regresjonskoeffisienten var større enn 0.99 på alle målte konsentrasjoner (10-250 ng/ml). Avslutningsvis ble det optimaliserte EME-systemet testet på reelle prøver ved Nasjonalt folkehelseinstituttet (FHI), ved divisjon for rettstoksikologi og rusmiddelforskning. Av åtte prøver var tre likblod og fem var fullblod fra levende personer. Resultatene fra EME-ekstraksjonene ble sammenlignet med resultater fra FHI hvor prøveopparbeidelsesmetoden var basert på LLE ved screening av amfetaminer, og det prosentvise avviket lå på mellom 4-34 %. Analysene viste at EME ga rene ekstrakter både fra ubehandlet fullblod og likblod.