Abstract
Ferdig opphakket og tørket rot av Tulbaghia alliacea L.f ble ekstrahert med diklormetan og metanol. Metanolekstraktet ble videre separert med væske-væske-ekstraksjon og fordelt i etylacetat, butanol og vann. Disse fem råekstraktene var utgangspunktet for videre separasjon ved hjelp av Versaflash-, Sephadex LH20-, MCI- og reverse phase C18-kolonnekromatografi. Det ble også benyttet preparativ og analytisk HPLC samt analytisk tynnsjiktkromatografi. De isolerte forbindelsene ble strukturoppklart ved hjelp av 1H-, 13C-, APT-, DEPT-, COSY- og HMQC-NMR-spektroskopi. Massespektrometer ble benyttet på ett av de identifiserte stoffene for å bekrefte molekylets masse.
2-propensyre, 2-metyl-3-[tetrahydro-2,3,5-trihydroxy-6-(hydroxymetyl)-2H-pyran-2-yl] ble isolert og identifisert fra butanolfasen av metanolekstraktet. Scopoletin og 1-deoksy-1-metylamino-3,6-(1,2-dihydroksyetyliden)-D-glukose var sannsynlige strukturer som ble isolert fra etylacetatfasen. Ferulasyre og 2R,3R-2-C-metyl-erytronolakton ble isolert og identifisert fra diklormetanfasen. I tillegg ble deler av et svovelholdig molekyl identifisert. Et stoff som lignet vaniljesyre ble også isolert. 2-propensyre, 2-metyl-3-[tetrahydro-2,3,5-trihydroxy-6-(hydroxymetyl)-2H-pyran-2-yl] har aldri tidligere blitt identifisert fra en plante og er dermed et nytt molekyl i planteverdenen. De andre identifiserte molekylene er ikke tidligere rapportert i fra noen plantedeler av T. alliacea.
Alle råekstraktene samt noen utvalgte fraksjoner og isolerte forbindelser ble tester for biologiske aktiviteter ved hjelp av radikalscavengingaktivitet overfor radikalet DPPH, og hemming av xantinoksidase (XO) fra kumelk med hypoxantin som substrat. I tillegg ble 5 fraksjoner testet for pro- og antiinflammatoriske egenskaper ved måling av IL-6 konsentrasjon i humant blod etter tilsetting av ekstraktene. Fraksjonene fra etylacetatekstratet hadde høyest DPPH- og XO-aktivitet. Vannekstraktet hadde lavest aktivitet. Disse to testene var ikke tidligere utført på 2R,3R-2-C-metyl-erytronolakton, molekylet viste seg å være inaktivt både som DPPH-scavenger og XO-hemmer.
Etylacetat- og diklormetanråekstraktet hadde kraftigste antiinflammatoriske egenskaper av de fem testede fraksjonene.