Abstract
Lactococcin G er et to-peptid bakteriosin produsert av melkesyrebakterien Lactococcus lactis LMG2081. Peptidene dette bakteriosin består av kalles α og β. Genene lagA og lagB som koder for henholdsvis α- og β-peptidene ble amplifisert, koblet sammen med ledersekvensen til bakteriosinet sakacin A, satt inn i hver sin pLPV111 ekspressjonsvektor og transformert inn i Lactobasillus sake Lb790/pSAK20. pLPV111 og Lactobasillus sakeLb790/pSAK20 er deler av et ekspressjonssystem med utgangspunkt i bakteriosinet sakacin A og det er velegnet til ekspressjon av bakteriosiner. Ved å flytte lagA- og lagB-genene til ekspressjonsvektorer og derved få α- og β-peptidene uttrykt hver for seg blir det enklere å foreta funksjons- og strukturstudier av lactococcin G. Det blir vesentlig enklere å rense peptidene som ellers med sine like ladninger, lignende størrelse og hydrofobisitet kan være vanskelige å separere fra hverandre.
Da dette arbeidet ble utført var det uklart hvilket gen som kodet for lactococcin G-immunitetsproteinet. Det var antatt at det tredje genet i lactococcin G-operonet (lagC) kodet for et immunitetsprotein ut fra dets størrelse og plassering i operonet. I dette arbeidet ble lagC-genet amplifisert, satt inn i ekspressjonsvektoren pMG36e og transformert inn i den lactococcin G-følsomme stammen Lactococcus lactis IL1403. Transformanter med lagC-genet viste økt motstandsdyktighet mot lactococcin G og det kan dermed konkluderes at lagC-genet koder for et immunitetsprotein